中性粒细胞与淋巴细胞比值对三阴性乳腺癌临床预后及与Ki - 67表达的影响

目的 探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值（neutrophil to lymphocyte ratio，NLR）对三阴性乳腺癌的临床预后影响及与Ki - 67表达的关系。方法 回顾性分析2006年1月 - 2012年12月于我院乳腺外科住院治疗的134例三阴性乳腺癌患者。NLR最佳临床分界值采用ROC曲线确定，并依此分NLR＜2.64组和NLR≥2.64组。临床独立预后因素采用单因素和多因素Cox回归模型分析。术后生存时间和生存曲线比较采用Kaplan - Meier和log - rank方法。Ki - 67的表达采用免疫组织化学方法检测。结果 NLR是三阴性乳腺癌的独立预后因素，最佳临界值为2.64。NLR＜2.64组术后中位DFS为39.10月，中位OS为52.30月；NLR≥2.64组术后中位DFS为27.35月，中位OS为37.35月。2组术后DFS和OS比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。NLR低组伴Ki - 67表达阴性的三阴性患者术后中位DFS和OS生存时间显著高于其他情况。结论 NLR是三阴性乳腺癌的关键影响预后因素，具有重复性强、非侵袭性、方便实用等特性，可用于预测三阴性乳腺癌临床预后。     

沉默己糖激酶结构域蛋白1表达对胃癌细胞增殖、侵袭、转移和上皮间充质转化的影响

目的探讨己糖激酶结构域蛋白1(HKDC1)成为胃癌潜在治疗靶点的可能性。方法用脂质体法向胃癌细胞NCI-N87,BGC-823和HGC-27转染沉默HKDC1表达的小干扰RNA(siRNA)(siRNA-1和siRNA-2),同时设阴性对照siRNA(siRNA-NC)组,分别获得NCI-N87-siRNA-NC,NCI-N87-siRNA-1和NCI-N87-siRNA-2细胞,BGC-823-siRNA-NC,BGC-823-siRNA-1和BGC-823-siRNA-2细胞,HGC-27-siRNA-NC,HGC-27-siRNA-1和HGC-27-siRNA-2细胞,用Western印迹法检测siRNA对HKDC1表达的抑制效果,并计算抑制率。将上述细胞接种入96孔板,孵育72 h后,磺酰罗丹明B(SRB)染色法检测细胞存活,计算细胞存活率。将上述细胞分别接种入无基质胶和铺有基质胶的Transwell小室,24 h后计数小室下室细胞数,分别检测细胞迁移和侵袭能力。收集上述细胞提取蛋白质,用Western印迹法检测上皮间充质转化相关蛋白E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和Snail的表达。结果分别转染siRNA-1和siRNA-2,对NCIN87-siRNA-1和NCI-N87-siRNA-2细胞HKDC1表达的抑制率分别为(20.5±0.1)%和(48.6±0.1)%,对BGC-823-siRNA-1和BGC-823-siRNA-2细胞的抑制率分别为(56.5±0.1)%和(58.9±0.1)%,对HGC-27-siRNA-1和HGC-27-siRNA-2细胞的抑制率分别为(63.5±0.1)%和(85.9±0.1)%。与对应的阴性对照组细胞相比,NCI-N87-siRNA-1和NCI-N87-siRNA-2细胞的存活率分别为(68.2±2.5)%和(70.4±2.1)%(P<0.01),BGC-823-siRNA-1和BGC-823-siRNA-2细胞的存活率分别为(77.0±0.1)%和(73.7±0.1)%(P<0.05),HGC-27-siRNA-1和HGC-27-siRNA-2细胞的存活率分别为(63.2±0.6)%和(70.4±0.1)%(P<0.01,P<0.05)。NCI-N87-siRNA-NC,NCI-N87-siRNA-1和NCI-N87-siRNA-2细胞的迁移数分别为488±43,319±27和262±37(P<0.01),侵袭数分别为143±8,68±2和30±2(P<0.01);BGC-823-siRNA-NC,BGC-823-siRNA-1和BGC-823-siRNA-2细胞的迁移数分别为1131±69,830±159和579±57(P<0.01),侵袭数分别为1127±113,781±97和565±96(P<0.01);HGC-27-siRNA-NC,HGC-27-siRNA-1和HGC-27-siRNA-2细胞的迁移数分别为453±36,190±25和57±16(P<0.01),侵袭数分别为645±53,462±62和264±47(P<0.01)。与对应阴性对照组相比,3种细胞HKDC1 siRNA-1和HKDC1 siRNA-2组细胞内E-钙黏蛋白的表达显著升高(P<0.05),N-钙黏蛋白和Snail的表达显著下降(P<0.05)。结论沉默HKDC1表达可抑制胃癌细胞增殖、侵袭和转移,并抑制上皮间充质转化。     

基于JNK/AMPK-mTOR调控Bcl-XL对急性髓系白血病细胞化疗敏感度的干预作用

目的:探究基于JNK/AMPK-mTOR调控Bcl-XL对急性髓系白血病细胞化疗敏感度的干预作用。方法:选取2020年1月－2021年1月在台州市中心医院进行的实验,白血病HL-60细胞株经过细胞培养、转染后,分为下调Bcl-XL组、急性髓系白血病组和阴性对照组。免疫细胞化学染色检测Bcl-XL,免疫印迹检测JNK/AMPK-mTOR相关蛋白的表达。结果:下调Bcl-XL组Bcl-XL表达低于急性髓系白血病组和阴性对照组(均P<0.05)。在24、48、72h,下调Bcl-XL组细胞吸光密度值、细胞增殖数均低于急性髓系白血病组和阴性对照组,细胞凋亡数高于急性髓系白血病组和阴性对照组(均P<0.05)。下调Bcl-XL组mTOR、P70S6K、P-JNK、AMPK、IC50值低于其他急性髓系白血病组和阴性对照组(均P<0.05)。结论:下调Bcl-XL可影响JNK/AMPK-mTOR信号通路的活性,参与急性髓系白血病细胞增殖、凋亡的过程,在急性髓系白血病中起作用。     

长效胰岛素联合口服“阿卡波糖”治疗2型糖尿病的效果分析

目的探讨长效胰岛素联合口服“阿卡波糖”治疗2型糖尿病的效果,为临床实践总结经验。方法该院于2016年5月—2018年5月期间收治的2型糖尿病患者中,从中选择了86例作为该次研究的病例,按不同的治疗方法进行分组,观察组与对照组的病例数均为43例,前者接受长效胰岛素联合口服“阿卡波糖”治疗,后者则接受长效胰岛素治疗,对比两组的治疗效果。结果两组患者治疗后糖化血红蛋白水平、血糖值均低于治疗前,餐后2 hC肽高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);相对于对照组来说,观察组治疗后体质量指数处于较低的水平,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组的SF-36评分与治疗前相比均有了明显的提高,且观察组更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对2型糖尿病患者采用长效胰岛素联合口服“阿卡波糖”治疗,能够有效提高临床疗效,促进胰岛功能修复,值得推广。     

单唾液酸四己糖神经节苷脂辅助治疗急性格林-巴雷综合征疗效观察

目的:评价神经节苷脂在促进格林-巴雷综合征患者恢复方面上的临床疗效。方法:将符合入选标准的56例患者随机分为两组,分别采用神经节苷脂和普通B族维生素治疗。治疗前后对两组患者定期进行Hughes评分。结果:两组Hughes评分于治疗2个月后均出现显著差异,差异有统计学意义(P<0.005),3个月时治疗组Hughes评分显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),两组无明显不良反应。结论:神经节苷脂是促进格林-巴雷综合征患者恢复的有效药物,其疗效优于普通B族维生素。     

治疗性单克隆抗体培养工艺的优化

目的优化抗TNF-α单克隆抗体的培养工艺,提高抗体表达水平。方法对商业化的化学限定培养基和流加物进行筛选,利用JMP软件对流加培养工艺(fed batch culture)进行全因子析因实验设计,对接种细胞密度、流加物的体积分数和流加时间进行优化。结果经过筛选确定了工程细胞株的基础培养基和流加物,经培养工艺优化后,使工程细胞株的最大活细胞密度由原工艺的7×106m L-1增加到14.6×106m L-1,抗体的表达水平由原工艺的1.0 g·L-1增加到2.5 g·L-1,分别增长了109%和150%。结论通过优化抗TNF-α单克隆抗体的培养工艺,使抗体的表达水平得到了提高。     

EMMPRIN、VEGF-C及淋巴管密度与乳腺癌浸润和转移的关系

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)和血管内皮生成因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)蛋白表达及D2-40标记的淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)与乳腺癌其浸润和转移的关系。方法免疫组化法检测乳腺增生组21例、导管内癌组10例、浸润性导管癌68例病灶内EMMPRIN、VEGF-C和LVD情况。计数资料比较采用χ2检验进行分析,相关性分析采用Spearman等级相关分析,计量资料三组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD法,P0.05为差异有统计学意义。结果三组EMMPRIN、VEGF-C的阳性率比较,差异均有统计学意义(均P0.05);与乳腺增生组比较,导管内癌、浸润性导管癌组EMMPRIN、VEGF-C的阳性率显著升高,差异均有统计学意义(均P0.05);乳腺增生组的LVD为(8.38±3.18),导管内癌、浸润性导管癌组分别为(9.80±2.78)、(10.82±5.51),三组LVD比较,差异有统计学意义(P0.05)。EMMPRIN和VEGF-C的阳性表达与有无淋巴结转移和淋巴结转移个数有关,差异均有统计学意义(均P0.05)。不同组织学分级EMMPRIN和VEGF-C的阳性率比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。乳腺癌组织中EMMPRIN与VEGF-C的表达呈正相关(rs=0.390,P0.05)。结论 VEGF-C在乳腺癌淋巴管生成长过程中起着重要的作用,EMMPRIN和VEGF-C在乳腺癌的浸润和转移过程中起着协同作用。